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二氧化碳培養箱的溫度是通過電熱絲給水套內的水加熱，再通過箱內溫度傳感器來檢測溫度變化，使箱內的溫度恒定在設置溫度。箱內溫度一般設定在37°C±0.2°C左右。在加熱過程中，加熱信號燈始終點亮。當培養箱的溫度達到設定溫度并穩定后，該加熱器停止加熱，信號燈熄滅。
二氧化碳培養箱的濃度是通過CO2濃度傳感器來進行檢測的。
CO2傳感器是用來檢測箱內CO2濃度，將檢測結果傳遞給控制電器及電磁閥等控制器件，如果檢測到箱內CO2濃度偏低，就會自動打開電磁閥，CO2進入箱體內，直到CO2濃度達到所設置的濃度，此時，電磁閥才會關閉，箱內CO2切斷，達到穩定的狀態。氣體混合泵將箱內底部CO2氣體與空氣充分混合，均勻后，再次注入箱內，避免了CO2的分層或不均勻的現象。
CO2采樣管將箱內CO2和空氣混合后的氣體取樣到機器外部面板的采樣口，以隨時是使用CO2濃度測定儀來檢測CO2的濃度是否達到要求。
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